4 gs: Волейбольные кроссовки Asics Upcourt 4 Gs (Junior)

Содержание

Масло минеральное 4GS Suniso 4 л. S4GS/4

Скачать описание Масло минеральное 4GS PDF

Минеральные масла Suniso 4GS рекомендованы крупнейшими производителями оборудования и изготовлены очисткой специально отобранной нафтеновой нефти. Масла обладают высокой степенью стабильности, практически не содержат парафина, обеспечивая тем самым отличные низкотемпературные свойства и безотказный срок службы оборудования. Масла Suniso серии GS могут быть использованы практически в любых установках, независимо от типа компрессора или температуры испарения и хорошо смешиваются с (H)CFC — хладагентами и природными хладагентами**. Поэтому масла Suniso серии GS могут применяться в промышленном, а также в бытовом холодильном оборудовании и системах кондиционирования воздуха.

**Перечень хладагентов: CFC R11, R12, R13, R131b1, R113, R114, R500, R502, R503, R22, R123, R124, R401a, R401b, R402a, R402b, R403b, R406a, R408a, R409a, Аммиак R717, Изобутан R600a

Технические характеристики масла Suniso 4GS

Плотность при 15°C	0,916 Кг/м³
Вязкость, при 40°C	55 сСт
Вязкость, при 100°C	5,9 сСт
Температура вспышки	179 °C
Температура застывания	-36 °C
Температура помутнения	-48 °C
Аналиновая точка	77 °C

Масло минеральное (ISO 68) Suniso 4 GS от «ООО «АЙСТЕКО»» ☎ +380 (67) 880-72-31 Kyivstar

Минеральное масло Suniso 4GS

Технические характеристики:

Производитель: Suniso (Бельгия)

Артикул производителя: 4GS

Тип: минеральное масло

Применение: универсальное масло для компрессоров

Вязкость: ISO 68

Фреон: R22, R12, R406a или аммиак

Объем: 4 л

Минеральные, высококачественные универсальные масла для компрессоров работающих с хладагентом R22, R12, R406a.

Одно из наиболее универсальных минеральных масел, используемое для низко, средне и высокотемпературных компрессоров.

В высокотемпературной области — при умеренных температурах конденсации.

Использовалось на конвейере заводов Copeland для заправки полугерметичных и спиральных компрессоров, предназначенных для работы на хладагентах CFC и HCFC.

Одобрено к применению большинством ведущих мировых производителей поршневых и спиральных компрессоров: Copeland, Bitzer, Dorin, Invotech, как для использования в новом оборудовании, так и для использования при техобслуживании.

Компания «АЙСТЕКО» предлагает к продаже холодильные масла компании Suniso 4 Gs /ISO 55/.

Suniso GS производства SUN OIL COMPANY (Бельгия) N.V — высококачественные компрессорные минеральные масла, рафинированные из специально подобранной нафтеновой нефти. Масло практически не содержат парафинов, характеризуются очень хорошей химической стабильностью, минимальным образованием осадка, отлично работают при низких температурах без отложений воска, благодаря чему продлевается срок службы и сокращаются расходы на ремонт оборудования.

Применение:

Масла Suniso серии GS применяются в компрессорах, работающих с хладагентами R-12, R-22, R-406a .

Могут использоваться практически во всех охлаждающих системах, независимо от рабочих температур компрессора или испарителя.

Особенно подходят для низкотемпературных систем, включая промышленные и бытовые холодильные установки и некоторые системы кондиционирования.

Авторская SPA вилла «GS» | Крым, Сакский район, Новофёдоровка

Мы очень признательны Вам за то, что Вы остановили свой выбор на нашей авторской вилле и сделаем все для Вашего комфортного и запоминающегося отдыха в Крыму, независимо от цели поездки и времени года.

Наша вилла находится в 40 минутах езды на легковой машине от аэропорта Симферополь, в непосредственной близости от известного на весь мир курорта Саки. Так же в пешей доступности (в трех минутах) новый, современный, песочно-галечный пляж, признанный в прошлом году как «Открытие Года 2019» Министерством курортов и туризма Крыма.

Добравшись и заселившись, первое, что отвлечет внимание гостей, несомненно наш эксклюзивный, открытый бассейн, пожалуй самый необычный в Саксом районе. Бассейн оборудован итальянской системой очистки ионами меди и серебра, без добавления хлора. А вечернее сияние сотен RGB диодов заполняет территорию летней террасы на десятки метров вокруг.

И все же, главной «изюминкой» нашей авторской виллы по праву являются 15 абсолютно уникальных, дизайнерских номеров, каждый из которых имеет свою легенду, тематику и соответствующий неповторимый дизайн интерьера.
Каждый из номеров создавался лично основателем виллы, совершенно неординарной и всесторонне-развитой личностью — Гульзарой Сейтаблаевой, игнорируя кризис, смену власти. В техниках оформления апартаментов гармонично сочетаются между собой комфорт, роскошь и неповторимый стиль. Именно поэтому нашим гостям доступен самый необычный и надолго запоминающийся отдых в Крыму.

Среди прочих, довольно приятных опций – это:

Роскошная «GS» Lounge SPA зона, совместившая в себе современный SPA комплекс c финской сауной, футуристическим джакузи-бассейном, тропическим душем и роскошную лаунж зону с домашним кинотеатром в одном!
Летняя терраса, обустроенная шезлонгами, солнцезащитными зонтами, баром, мангалом, зоной барбекю.

Помимо солнца моря и отдыха, арт команда «GS» обещает нашим гостям 100%ый интерактив, а именно — профессиональные мастер-классы дизайна, уроки вокала и диджеинга, дегустаций вин, модных показов, live перформансов, онлайн трансляции выступлений известных музыкантов.

Мы с нетерпением ждем Вас!

Требования к работе в правительстве США для уровня квалификации GS4 | Работа

GS-4 федеральные государственные служащие выполняют ряд обязанностей, требующих понимания федерального агентства, в котором они работают. Ожидается, что GS-4 будет выносить независимое суждение при использовании государственных ресурсов и применении соответствующих положений, правил и процедур. Требования к работе соответствуют требованиям к служащим и административным работникам частного сектора. Сотрудники GS-4 также работают под минимальным контролем при выполнении рутинных рабочих задач, а некоторые функции требуют взаимодействия с персоналом других федеральных агентств и сотрудниками сторонних организаций и предприятий.

Система классификации

Система классификации правительства США была разработана в 1940-х годах, кульминацией которой стал Закон о классификации 1949 года, который установил правила и положения для классификации должностей федеральных государственных служащих. В прямом подходе федерального правительства к классификации федеральных должностей используются две основные категории: общий график и высшие руководящие должности. Общие штатные должности варьируются от GS-1 до GS-15; Должности высшего управленческого персонала схожи с руководящими должностями в частном секторе и не включены в классификации GS.Внутри каждой ступени GS 10 ступеней. Сотруднику GS-4 не нужно продвигаться на каждом этапе для достижения GS-5, при условии, что он соответствует квалификации для более высокого разряда.

Уровень

Позиция GS-4 близка к начальному уровню по общей шкале графика; это не означает, что работа GS-4 менее важна, чем работа GS-15. Ряд высокопоставленных федеральных государственных служащих начинали свою карьеру в качестве служащих GS-3, GS-4 или GS-5 и продвигались по службе в одном агентстве или перейдя в другие федеральные агентства. Исходя из навыков и квалификации соискателя, она не должна поступать в федеральную систему в качестве GS-1; она может поступить на уровень GS-4 или выше, обладая необходимыми техническими навыками и опытом.

Квалификация

Федеральные служащие, имеющие уровень GS-4, обычно должны иметь один год общего опыта работы и два года образования сверх уровня средней школы. GS-4 не обязательно требует диплома младшего специалиста колледжа, если у него два года обучения после окончания средней школы.Федеральное правительство отдает должное образованию и опыту; человек с трехлетним образованием после окончания средней школы и без опыта работы может рассматриваться на должность GS-4. Сотрудникам GS-4 не требуется какой-либо специализированный опыт, связанный с конкретной работой или конкретным агентством, чтобы получить квалификацию для этого уровня.

Должности

Некоторые репрезентативные должности для сотрудников GS-4: клерк по расчету заработной платы, машинистка, расшифровщик данных, клерк-стенографист и помощник клерка по автоматизации. Сотрудники GS-4, в обязанности которых входит ввод или расшифровка данных, должны иметь возможность подтвердить свою скорость и точность, чтобы иметь право на определенные должности. Например, машинистки-клерки должны уметь печатать 40 слов в минуту, а расшифровщики данных GS-4 должны печатать не менее 25 слов в минуту.

Заработная плата

В 2012 году диапазон базового оклада для федерального государственного служащего на уровне GS-4 составлял от 24 518 до 31 871 долл. США в год и может увеличиваться в зависимости от места работы сотрудника.Например, сотрудники GS-4 в Бостоне зарабатывают от 30 598 до 39 775 долларов, а сотрудники GS-4 в Лос-Анджелесе зарабатывают от 31 177 до 40 257 долларов, согласно данным о местных зарплатах Управления кадров США за 2012 год.

Ссылки

Writer Bio

Ruth Мэйхью пишет с середины 1980-х годов, а с 1995 года является экспертом в области управления персоналом. Ее работа опубликована в книге «Многопоколенческая рабочая сила в сфере здравоохранения», и ее цитировали в многочисленных публикациях, в том числе в журналах. и учебники, посвященные методам управления человеческими ресурсами.Она имеет степень магистра социологии Университета Миссури в Канзас-Сити. Рут проживает в столице страны, Вашингтоне, округ Колумбия.

Южно-Тихоокеанский регион НАСЛЕДИЕ Шкала 4-8-4 GS-2 (черный) # 4412

Паровозы серии GS

Представленные в 1937 году поезда South Pacific Daylight стали одними из самых популярных маршрутов в стране. Автомобили и локомотивы получили блестящую окраску оранжевого, красного и серебристого цветов. Модернизированные, современные локомотивы 4-8-4, получившие название класса GS -2, стали первыми предпочтительными двигателями для этих престижных маршрутов.

Почти копия GS-2 была произведена снова в 1943 году как для южной, так и для западной части Тихого океана. Эти 4-8-4 не были модернизированы из-за нехватки материалов во время войны. Локомотивы класса GS-6 на SP или GS-64 на WP превосходно справлялись с грузовыми и пассажирскими перевозками.

Электроэлементы
Система управления LEGACY
Освещение
Дымовая установка
Беспроводной модем
Система Odyssey II
LEGACY RailSounds

Артикул: 6-11419
Размеры: Длина: 28 & rdquo;
Датчик: стандартная шкала O
Цена: 1299 руб. 99
год: 2012
железнодорожная линия: Южный Тихий океан

Минимальный радиус: O-54
Год по каталогу: 2013
Название каталога: Lionel 2013 Fall Catalog
Номер дороги: 4412

НАСЛЕДИЕ GS-2 РУКОВОДСТВО 12/12 Видео о продукте LEGACY GS-2 12/12

Устаревшая система управления оборудована & ndash; может работать в режиме LEGACY Control, в режиме TrainMaster Command Control или в обычном режиме со стандартным трансформатором
Регулятор скорости Odyssey II с переключателем вкл. / Выкл.
LEGACY RailSounds , включающая: -диалог CrewTalk и объявления TowerCom, каждый из которых имеет разные сценарии в зависимости от того, движется локомотив или остановился-шесть официальных скоростей железной дороги с диалоговым окном CrewTalk-восемь уровней оборотов дизельного двигателя-НАСЛЕДИЕ Управление «рожком для квиллинга в реальном времени» с мгновенным откликом для реалистичной подписи «квиллинг» и своевременными предупреждающими сигналами — однократное нажатие или непрерывные звуки механического звонка — управление последовательностью воспроизводит звуковые эффекты всей поездки, включая предупреждающие звуки и объявления, на основе движение и скорость локомотива-Текущая скорость и топливо диалог, звуковые эффекты заправки

Мощный необслуживаемый двигатель с импульсным маховиком
Беспроводная привязка между локомотивом и тендером
Электроэлемент на задней части тендера
Направленное освещение, включая рабочую фару и задний фонарь на задней части тендера
Светящиеся классификационные огни на передней части локомотива
Шины тяговые
Дымовая установка с вентилятором
Регулируемый выход дыма
Освещение салона в кабине
Корпус, пилот и рама локомотива, литые под давлением из металла
Литой под давлением металлический тендерный кузов и тележки

Высокий уровень отдельно наносимых металлических деталей
Строительные плиты раздельно
Аутентично детализированный интерьер кабины
Мерцание топки в кабине
Стеклопакеты кабины
Фигурки инженера и пожарного

Руководства
Последние руководства можно найти в нашем разделе поддержки.
Запасные части
Покупайте любые запасные части в нашем разделе поддержки.
Контакт
Обратитесь в сервисный центр для ремонта продукта

Общий график

Общий график классификации и оплаты

Система классификации и оплаты по Общему расписанию (GS) охватывает большинство гражданских служащих федерального уровня (около 1,5 миллиона во всем мире) на профессиональных, технических, административных и канцелярских должностях.Стандарты классификации GS, квалификация, структура оплаты и связанные с ними кадровые политики (например, общие кадровые и административные правила оплаты) администрируются Управлением персонала США (OPM) на общегосударственной основе. Каждое агентство классифицирует свои должности GS, а также назначает и платит своим сотрудникам GS, занимающим эти должности, в соответствии с установленными законом и руководящими принципами OPM.

В Общей таблице 15 оценок — от GS-1 (низшая) до GS-15 (высшая). Агентства устанавливают (классифицируют) оценку каждой должности в зависимости от уровня сложности, ответственности и требуемой квалификации.Лица с аттестатом о среднем образовании и без дополнительного опыта обычно имеют право на должности GS-2; со степенью бакалавра для должностей категории GS-5; и со степенью магистра для должностей GS-9.

Каждая ступень имеет 10 ступеней ступени (ступени 1–10), каждая из которых составляет примерно 3 процента от заработной платы сотрудника. Повышение ступеней внутри класса основано на приемлемом уровне успеваемости и продолжительности жизни (период ожидания составляет 1 год на ступенях 1-3, 2 года на ступенях 4-6 и 3 года на ступенях 7-9).Обычно для перехода от ступени 1 к ступени 10 в рамках одного разряда GS требуется 18 лет, если сотрудник остается в этом единственном разряде. Тем не менее, сотрудники с выдающимися (или эквивалентными) показателями производительности могут рассматриваться для дополнительного повышения качества (максимум один раз в год).

Нового сотрудника GS обычно нанимают на первой ступени соответствующей категории GS. Однако при особых обстоятельствах агентства могут разрешить более высокую ступень для вновь назначенного федерального служащего на основании особых потребностей агентства или более высокой квалификации потенциального служащего.Текущие федеральные служащие, которые переходят на должность GS и не считаются вновь назначенными, могут иметь размер оплаты выше шага 1, основанный только на предыдущей федеральной ставке оплаты труда граждан (т. Е. Правиле максимальной ставки) в соответствии с политикой получающего агентства.

Сотрудники

GS могут повышаться до более высоких должностей путем продвижения по службе через определенные промежутки времени (как правило, по крайней мере, через год), как это определено правилами OPM, квалификационными стандартами и политиками агентства, вплоть до полного потенциала продвижения по службе, указанного в объявлении о вакансии.После этого необходимо соревнование по принципам системы заслуг для перехода на более высокий уровень GS. Как правило, повышение по службе в GS равно как минимум двум ступеням в классе GS непосредственно перед повышением до более высокого уровня GS.

Базовый график оплаты труда GS обычно ежегодно корректируется каждый январь с повсеместным увеличением заработной платы на основе общенациональных изменений в стоимости заработной платы и окладов работников частного сектора. Большинство сотрудников GS также имеют право на местную оплату, которая представляет собой географическую процентную ставку, которая отражает уровни оплаты труда нефедеральных работников в определенных географических регионах, определенные в ходе опросов, проведенных U.С. Бюро статистики труда. В настоящее время существует 47 платных территорий, которые охватывают 48 штатов и Вашингтон, округ Колумбия, а также Аляску, Гавайи, а также территории и владения США. Сорок четыре района оплаты населенных пунктов покрывают крупные мегаполисы (например, Лос-Анджелес, Нью-Йорк, Вашингтон, округ Колумбия), два — целые штаты — Аляску и Гавайи, а остальная часть Соединенных Штатов, их территории и владения включены в универсальная платежная зона населенного пункта Остальная часть США (RUS). Сотрудники GS в зарубежных регионах не имеют права на оплату по месту жительства.Президент и Конгресс могут вносить изменения в применимые в иных случаях поправки к оплате труда по всем направлениям и по месту жительства.

Из-за серьезных трудностей с укомплектованием персоналом определенных профессий на уровне GS в определенных географических регионах OPM может утвердить специальные ставки, которые выше, чем обычные ставки GS.

Структуры активных комплексов рецептор меланокортина-4 – Gs-белок с NDP-α-MSH и сетмеланотидом

Образование комплекса MC4R – Gs с агонистами NDP-α-MSH и сетмеланотидом

Для определения крио-EM структуры передачи сигналов MC4R комплексов с различными агонистами, мы использовали NDP-α-MSH и сетмеланотид из-за их клинической значимости и высокой связывающей способности in vitro ( K _i = 0.7 нМ ¹⁶ и 2,1 нМ, ¹² соответственно) по сравнению с α-MSH ( K _i = 51 нМ ¹⁶), что было важно для получения стабильных сложных образцов. Оба лиганда различаются по своей общей пептидной структуре. NDP-α-MSH представляет собой линейный пептид из 13 аминокислот и модифицирован только в двух положениях (метионин (M4) на норлейцин (Nle) и l-фенилаланин (lF) на d-фенилаланин (dF)) по сравнению с α-MSH. ¹³ (рис. 1а). В отличие от этого сетмеланотид представляет собой циклический пептид из 8 аминокислот, который напоминает α-MSH только в трех положениях, в центральном H ⁰ x ¹ R ² W ³ основной мотив (рис.1a) (объединяющая схема нумерации пептидов лигандов MCR, основанная на консервативном мотиве H ⁰ x ¹ R ² W ³, представлена на рис. 1a и используется по всему тексту).

Рис. 1: Крио-ЭМ комплексные структуры MC4R – Gs, связанные с NDP-α-MSH и сетмеланотидом.

a Выравнивание последовательностей агонистов MC4R и антагонистов SHU9119. Для сравнения и упрощения введена система нумерации лигандов на основе основного мотива HxRW α-MSH и указана в верхнем индексе для каждого пептидного остатка. b , c Крио-ЭМ плотности комплексов MC4R-Gs, стабилизированных Nb35 и связанными агонистами, отображаемые с зеркальной точки зрения. Gβ, темно-синий; Gγ, красный; Nb35, желтый. d Суперпозиция обоих агонистов. e , f Сравнение между SHU9119-антагонизированным (синий) MC4R ¹⁶ и структурами активного состояния, либо с цитоплазматической точки зрения ( e ), либо изнутри мембранной плоскости ( f ). Стрелки указывают на значительные относительные пространственные различия трансмембранных спиралей (TM5, TM6 и TM7).

Мы подтвердили связывающую способность обоих лигандов с помощью анализа BRET на основе нано-люциферазы (дополнительная информация, рис. S1). ¹⁷ С помощью нашего установленного рабочего процесса с использованием Sf 9 клеток насекомых мы получили человеческий MC4R дикого типа без модификаций в количестве белка, достаточном для сборки комплекса с Gs-белком (дополнительная информация, рис. S2). Однако существует сильная тенденция к олигомеризации MC4R после экстракции с мембран на основе детергентов.Эта популяция олигомеров была уменьшена путем прямого образования комплекса с очищенным детергентом Gs-белком ¹⁸ и MC4R, который оставался внедренным в мембрану. ¹⁹ После стабилизации комплекса путем добавления нанотела-35 (Nb35) ¹⁸ и нуклеотидгидролазной апиразы полученные комплексы MC4R – Gs – Nb35, не содержащие нуклеотидов, связанные с агонистами, экстрагировали из мембран путем солюбилизации и очищали (дополнительная информация , Рис. S2). Стабильные комплексы либо с агонистом NDP-α-MSH, либо с сетмеланотидом были использованы для подготовки крио-ЭМ-сетки и анализа отдельных частиц, что дало крио-ЭМ-карты с глобальным разрешением 2.9 Å и 2,6 Å соответственно (рис. 1b, c; дополнительная информация, рис. S3 – S6 и таблица S1; материалы и методы).

Общая структура комплексов MC4R-Gs, связанных с агонистами NDP-α-MSH и сетмеланотидом

Крио-ЭМ-карты выявили четко определенные плотности, которые облегчают однозначное моделирование вторичной структуры и ориентации боковых цепей комплекса MC4R-Gs в виде а также ион-кофактор кальция (Ca ²⁺), несколько молекул воды и пептиды-агонисты NDP-α-MSH и сетмеланотид, связанные с их соответствующими LBP (рис. 1б – г; Дополнительная информация, рис. S7, S8).

Только некоторые компоненты, известные своей высокой гибкостью, такие как рецептор N- (Ntt) и C-концы (Ctt), внутриклеточная петля (IL) 1, IL3 и внеклеточная петля (EL) 1, а также как альфа-спиральный домен Gαs, не были полностью встроены в окончательную карту (смоделированные остатки перечислены в разделе «Материалы и методы»).

Оба агониста связаны в первую очередь с мотивом H ⁰ x ¹ R ² W ³ между EL и внутри трансмембранного пучка рецептора (рис.1г). Лиганды взаимодействуют с MC4R посредством обширных ван-дер-ваальсовых, гидрофобных и полярных взаимодействий с остатками в трансмембранных спиралях (TMs), а также с EL2 (дополнительная информация, рис. S9 – S11 и таблицы S2 – S6). Специфические структурные характеристики MC4R приводят к широко открытому внеклеточному преддверию LBP для больших пептидных лигандов (Fig. 2a-c).

Рис. 2: Способы связывания пептидных лигандов и кальция в MC4R.

a — c Сферические представления NDP-α-MSH (зеленые атомы углерода), сетмеланотида (фиолетовые атомы углерода) и SHU9119 (синие атомы углерода), связанных в их соответствующих сайтах связывания в MC4R (обрезанная поверхность, оранжевый , светло-желтый, серый соответственно).Выделены d — f остатки рецепторов TM3 и TM6, участвующие во взаимодействиях пептида и / или Ca ²⁺. Жирная красная пунктирная линия в d , e указывает на отсутствие взаимодействий L133 ^3.36 с остатком агониста d-F ¹; красная пунктирная двунаправленная стрелка в e указывает на гидрофобное взаимодействие между F261 ^6,51 и сетмеланотидом d-F5 ¹ (дополнительная информация, таблица S6), а в f указывает на взаимодействие между d-Nal4 ¹ из антагонист SHU9119 и L133 ^3.36. g — i Вид сверху d — f , подчеркивающий все межмолекулярные гидрофильные взаимодействия, оцениваемые по минимальному расстоянию 3,5 Å (черные пунктирные линии) (дополнительная информация, рисунки S9 – S11 и таблицы S2– S5). Показаны остатки NDP-α-MSH 4-11 ( г ).

Во-первых, EL2 состоит всего из четырех аминокислот и не включает цистеин, что значительно отличается от большинства других GPCR класса A ²⁰ (выравнивание последовательностей в дополнительной информации, рис.S12). Следовательно, высококонсервативный дисульфидный мостик между EL2 и TM3 ²⁰ отсутствует. Вместо C ^3,25 (цифры с надстрочным индексом в соответствии с объединяющей нумерацией Баллестероса и Вайнштейна для GPCR класса A ²¹) в TM3, MC4R содержит аспартат (D122 ^3,25), который является частью лиганда и Ca ^2+.-связывающая сеть (рис. 2d – i).

Во-вторых, дисульфидный мостик между C271 ^EL3 и C277 ^EL3 в EL3 вызывает специфическую спиральную конформацию перехода EL3 – TM7, которая была структурно описана только для двух липидных эволюционно связанных GPCR (дополнительная информация, рис.S13a, б). Второй наблюдаемый дисульфидный мостик MC4R между C279 ^7,30 (в EL3) и C40 ^Ntt на N-конце (дополнительная информация, рис. S13c) согласуется с предыдущими экспериментальными исследованиями MC4R и MC1R ²² и стабилизирует EL3- Ntt взаимодействуют, тем самым способствуя образованию внеклеточного LBP.

В-третьих, в отличие от большинства других GPCR класса A, MC4R не имеет ни пролина в TM2 (дополнительная информация, Figs. S12b, S13d), ни высококонсервативного пролина P ^5.50 в TM5 (дополнительная информация, рис. S12c, S14), что обычно вызывает изгиб и выпуклость, а также небольшое вращение TM. Примером этого является сдвиг внеклеточного TM2 к мембране на ~ 6 Å по сравнению с другими известными структурами, а прямой MC4R TM5 показывает значительные отличия от GPCR с пролином (дополнительная информация, рис. S14), что, наконец, изменяет интерфейс TM5-TM3. и вместе образуют преддверие связывания лиганда MC4R.

Кроме того, комплексы MC4R-лиганд раскрывают ранее известный вклад Ca ²⁺ в качестве кофактора ^23,24 и предлагают новое понимание его влияния на соответствующие способы связывания лиганда (рис. 2г – i, 3).

Рис. 3: Дифференциальный Ca ²⁺ и связывание лиганда в TM3.

Суперпозиции NDP-α-MSH (остатки 4–11), сетмеланотида и SHU9119, связанных с MC4R (оранжевый, светло-желтый и серый рисунки скелета). Суперпозиция обоих агонистов. Остатки, общие для агонистов, отмечены розовым цветом. b , c Режим связывания лиганда SHU9119 сравнивают с NDP-α-MSH ( b ) и сетмеланотидом ( c ).Двунаправленные красные стрелки указывают на различия в относительном пространственном расположении остатков TM3 или иона Ca ²⁺. Подробные сведения о межмолекулярных взаимодействиях приведены в дополнительных сведениях, таблицах S5 и S6. d Относительные изменения ориентации TM3 также обнаруживаются в Ca ²⁺ и взаимодействующих с ним остатках мотива EDD.

И широкий внеклеточный вестибюль, и кофактор кальция определяют уникальный LBP, который адаптирован для интеграции сигналов от лигандов разного размера и для индукции специфических клеточных ответов через различные пути передачи сигналов G-белка.

Сравнение структур активного состояния с антагонизированной структурой MC4R показывает различия в ориентации боковых цепей в высококонсервативных аминокислотных мотивах CWxP ^6,50 (C257 ^6,47 -W258 ^6,48 -P260 ^6,50 в TM6), N (D) P ^7,50 xxY (D298 ^7,49 −P299 ^7,50 −Y302 ^7,53 дюйма TM7) и DR ^3,50 Y (D146 ^3,49 −R147 ^3,50 −Y148 ^{^{. Эти связанные с активным состоянием изменения в консервативных мотивах связаны со связыванием агонистов и G-белка и связаны с глобальными спиральными движениями в структуре рецептора при активации.Они в основном включают закрученный внутрь TM5 и TM6, смещенный наружу на ~ 13 Å по сравнению с инактивированной структурой, отличительный признак активации рецептора, который открывает полость связывания для G-белков (Fig. 1e, f).}}

Сходства в связывании агонистов с MC4R

Сравнение двух структур MC4R, связанных с агонистами NDP-α-MSH и сетмеланотидом, и ранее опубликованная структура MC4R в комплексе с антагонистом SHU9119 ¹⁶ показывает, что все лиганды глубоко скрыты в область внеклеточного рецептора между TM, но с LBP разной формы (рис. 2а – в). Эти уникальные формы обусловлены различными остатками лиганда (рис. 1a) и тем фактом, что SHU9119 и сетмеланотид являются циклическими и более компактными по сравнению с линейным пептидом NDP-α-MSH (рис. 1d, 2).

Все три лиганда имеют общий центральный аминокислотный мотив H ⁰ x ¹ R ² W ³. Этот мотив, похожий на четыре пальца, важен для формирования наиболее релевантных взаимодействий внутри LBP. Позиция x ¹ всегда находится в нижней части LBP (рис.2г – е). NDP-α-MSH и сетмеланотид имеют стереоизомер d-фенилаланин (d-F ¹) вместо l-F в положении x ¹. Эта замена важна для повышения эффективности NDP-α-MSH по сравнению с α-MSH. ¹³

Мотив H ⁰ x ¹ R ² W ³ Мотив образует сходные взаимодействия для обоих агонистов, включая водородные связи между H ⁰ и T101 ^2,61 в TM2 и W ³ с S188 ^EL2 в EL2 и h364 ^{6. 54} в TM6 (рис. 2ж, з). Лиганды также имеют аналогичные гидрофобные контакты, такие как H ⁰ до F284 ^7,35 -L288 ^7,39 -F51 ^1,39 или dF ¹ до I129 ^3,32 и W ³ до 6,58 до Y268 −I194 ^5,40 −L197 ^5,43 (дополнительная информация, рис. S9, S10; полный список в дополнительной информации, таблица S6).

В обеих структурах, связанных с агонистами, d-F ¹ в положении x ¹ стабилизирует Ca ²⁺ посредством взаимодействия основной цепи (рис.1a, 2g, h), а боковая цепь указывает на ядро рецептора и окружена гидрофобными аминокислотами, а именно C130 ^3,32, L133 ^3,35, I185 ^4,61, L197 ^5,34, F261 ^6,51 и L288 ^7,39. Функциональная характеристика замен в этих и других положениях в расширенном LBP представлена на рис. 4, дополнительная информация, рис. S15 и в таблицах S7 – S9 (аффинности связывания и значения EC ₅₀ для нескольких лигандов MC4R указаны в дополнительной информации, Таблица S10).Гидрофобные остатки I291 ^7,42 и L133 ^3,35 близки к W258 ^6,48 по высококонсервативному мотиву CWxP ^6,50 в TM6, который часто контактирует с лигандами в нескольких GPCR класса A (например, мускариновый ацетилхолиновый рецептор комплекс, ²⁵ 5-HT2A серотониновый рецептор-комплекс Gq ²⁶) Напротив, для MC4R не существует прямых взаимодействий между лигандами и W258 ^6,48 (рис. 2d, e). В целом, оба агониста имеют набор сходных рецепторных контактов, в частности, с TM3 и TM6, хотя характер взаимодействия рецептора и агонистов с кофактором кальция фактически различается.

Рис. 4. Передача сигналов Gs и Gq / 11 мутантов MC4R с аминокислотными заменами в областях связывания лиганда и G-белка.

a — h Сигнальные данные для вариантов MC4R, несущих мутации в области связывания лиганда ( a , c , e , g ) и в интерфейсе G-белка ( b , d , f , h ). Кривые «концентрация-ответ» для накопления цАМФ (Gs-активация) при стимуляции NDP-α-MSH ( a , b ) и сетмеланотидом ( e , f ).Кривые концентрация-ответ передачи сигналов Gq / 11, определенных активацией PLC дикого типа MC4R (WT) или мутантов MC4R на NDP-α-MSH ( c , d ) и сетмеланотид ( g , h ) стимуляция. Дополнительные данные сигнализации показаны в дополнительной информации на рис. S15, включая сигнализацию MC4R, индуцированную α-MSH. Значения E _MAX и EC ₅₀ сведены в Дополнительную информацию, Таблицы S7-S10.

Кальций является важным связующим звеном между лигандами и MC4R

В обеих представленных здесь структурах MC4R, связанных с агонистами, Ca ²⁺ прикреплен по центру между TM2, TM3 и пептидными агонистами.Это наблюдение согласуется с недавними сообщениями о структурах MC4R и исследованиях связывания кальция. ^16,27 В случае NDP-α-MSH, Ca ²⁺ пятикратно координирован взаимодействиями основной цепи с E5 ^-1 и d-F7 ¹ и взаимодействиями боковой цепи рецептора с E100 ^2,60, D122 ^3,25 и D126 ^3,29 (рис. 2g). Последние три остатка составляют мотив EDD в TM2 и TM3.

Чтобы проверить релевантность лиганд-интерфейса между TM2 и TM3, мы генерировали сериновые или аспарагиновые мутации (сохраненные гидрофильные боковые цепи) E100 ^2.60, D122 ^3,25 и D126 ^3,29, и протестировали их способность накапливать цАМФ (Gs-индуцированная передача сигналов) при стимуляции NDP-α-MSH, сетмеланотидом или α-MSH (рис. 4; дополнительная информация, таблицы S7. , S8). Кроме того, мы также исследовали способность всех трех мутантов к активации PLC (передача сигналов, индуцированная семейством Gαq / Gα11 / Gα14 / Gα15) с помощью NDP-α-MSH и сетмеланотида, используя анализ репортерного гена NFAT (рис. 4; дополнительная информация, Таблица S9).

Сетмеланотид и α-MSH неспособны стимулировать передачу сигналов Gs в этих трех вариантах рецептора (дополнительная информация, таблица S9), что подтверждает наблюдаемую существенную роль мотива EDD в связывании лиганда.Предыдущие исследования мутагенеза уже показали, что замена D126A почти полностью устраняется, а в случае D122A и E100A значительно снижает передачу сигналов цАМФ, опосредованную NDP-α-MSH. ^28,29 В наших данных о передаче сигналов Gs, NDP-α-MSH демонстрирует снижение активности на два порядка для E100N и D126S, но в отличие от двух других лигандов, он показывает только небольшое снижение EC ₅₀ при вариант D122S (9 нМ вместо 1,2 нМ для MC4R дикого типа) (рис. 4a, e), что предполагает различия в детальных способах связывания.Это наблюдение дополнительно подтверждается предыдущим открытием, что α-MSH, в отличие от NDP-α-MSH, не индуцирует передачу сигналов в варианте D122A MC4R. ³⁰

Данные по передаче сигналов PLC мутантов по мотиву EDD (рис. 4c, g) выявили сходные тенденции к инактивации, наблюдаемые для передачи сигналов Gs, таким образом предполагая значительную роль этих остатков рецептора также в опосредовании стимуляции PLC.

Здесь мы также проверили, как стимуляции NDP-α-MSH и сетмеланотидом MC4R дикого типа различаются между двумя сигнальными путями.Оба лиганда демонстрируют сходную активность в отношении индукции накопления цАМФ и активации PLC, но различаются по своей эффективности (дополнительная информация, рис. S15k, l). NDP-α-MSH более эффективен при активации Gs, тогда как сетмеланотид более эффективен при активации PLC.

Особенности взаимодействия сетмеланотида с кальцием и MC4R

По сравнению с NDP-α-MSH сетмеланотид образует уникальные взаимодействия с остатками Ca ²⁺ и TM3 в MC4R. Специфический для сетмеланотида R1 ^-3 играет ключевую роль рядом с R6 ² и связывается с D122 ^3.25 (рис. 2h). Это структурное наблюдение подтверждается данными передачи сигналов Gs варианта D122S, которые демонстрируют полную потерю передачи сигналов Gs при стимуляции сетмеланотидом, но только небольшое снижение для NDP-α-MSH (Fig. 4a, e). Вместе оба остатка R1 ^-3 и R6 ² образуют плотный аргининовый зажим на расстоянии водородной связи с D122 ^3,25 мотива EDD, обеспечиваемый циклизацией пептида. У этого зажима аргинина есть три последствия. Во-первых, в отличие от комплекса NDP-α-MSH, D122 ^3.25 полностью ориентирован на Ca ²⁺, что подтверждается картой плотности крио-ЭМ. Во-вторых, боковая цепь R6 ² показывает немного иную ориентацию, наблюдаемую в структуре NDP-α-MSH-MC4R, то есть больше по направлению к N123 ^3,26 в TM3 и дальше от TM4 (рис. 2g, h). Важность этого сетмеланотид-специфического взаимодействия с N123 ^3,26 подтверждается сниженной эффективностью Gs-связывания мутанта MC4R N123A, что не наблюдается для NDP-α-MSH (рис. 4a, e).Это структурное различие сопровождается небольшим горизонтальным сдвигом TM3 в комплексе сетмеланотид-MC4R, что приводит к лиганд-зависимому позиционированию Ca ²⁺ (Fig. 3a, d). В-третьих, сетмеланотидное взаимодействие между R1 ^-3 и D122 ^3,25 снижает количество взаимодействий с кофактором Ca ²⁺, участвующим в стабилизации интерфейса пептид-TM2-TM3 с четырехкратной координацией иона, в отличие от к пятикратно координированному Ca ²⁺ в рецепторе, связанном с NDP-α-MSH (см. выше).Уменьшение количества взаимодействий сетмеланотидов также связано с двойной конформацией E100 ^2,60, в которой одна конформация участвует в сети водородных связей с молекулой воды, а h5 ⁰ (рис. 2h).

Сравнение пептидных последовательностей двух синтетических агонистов MC4R LY2112688 (фиг. 1a) и сетмеланотида позволяет предположить, что только два остатка, которые различаются между пептидами, ответственны за способность сетмеланотида вызывать более выраженную передачу сигналов Gq / 11 по сравнению с LY2112688.¹¹ LY2112688 отклоняется на E3 ⁻¹ вместо d-A3 ⁻¹ и на d-R1 ⁻³ вместо l-R1 ⁻³, который специфически взаимодействует с D122 ^3,25 в Комплекс сетмеланотид – MC4R – Gs (рис. 1а, 2д). Эти два различия достигают высшей точки в ~ 50 раз более сильной индукции Gq / 11-опосредованной передачи сигналов сетмеланотидом по сравнению с LY2112688. ¹¹

Существенные особенности TM6, необходимые для активного состояния MC4R

В GPCR класса A сильное движение TM6 наружу (~ 13 Å в MC4R, измеренное на M241-Cα) к мембране является отличительной чертой активного состояния. состояния конформации, поскольку он открывает внутриклеточную полость для связывания G-белка (рис. 1д). Это смещение становится возможным и структурно очевидным за счет увеличения образования излома на высококонсервативном мотиве CWxP ^6,50 (₂₅₇ CWAP ₂₆₀ в MC4R), что является существенным для ранее предложенного механизма активации «тумблерного переключателя» в различных GPCR. ³¹ Сравнение MC4R с известными (не) активными структурами GPCR класса A выявило аналогичные изменения вокруг W258 ^6.48 мотива CWxP ^6.50 между неактивными или антагонизированными по сравнению с активными структурами, как наблюдали, e.g., в родопсине ³² и рецепторе 5-HT2A серотонина ²⁶ (дополнительная информация, рис. S16). Следовательно, мы предлагаем подобное переключательное движение TM6 во время активации MC4R в мотиве CWxP ^6.50.

Два остатка в MC4R TM6 участвуют в связывании лиганда перед мотивом CWxP ^6,50, а именно F261 ^6,51 и h364 ^6,54. h364 ^6,54 находится на расстоянии водородной связи с кислородом основной цепи лиганда W ³ возле входа в внеклеточный вестибюль (рис. 2г – i). Соответственно, мутант h364A демонстрирует значительное снижение активности (EC ₅₀) (рис. 4a, e) в отношении накопления цАМФ, индуцированного NDP-α-MSH и сетмеланотидом, и полностью снижает передачу сигналов эндогенного агониста α-MSH (Supplementary информация, рис. S15e).

F261 ^6.51 не взаимодействует напрямую с NDP-α-MSH, но образует гидрофобное взаимодействие с остатком d-F ¹ в структуре сетмеланотид-MC4R (рис. 2d, e; дополнительная информация, таблица S6).Это наблюдаемое структурное отклонение подтверждается данными передачи сигналов Gs для мутации F261V. Здесь наблюдалось снижение эффективности накопления цАМФ для сетмеланотида (29 нМ) по сравнению с диким типом (1,2 нМ) в отличие от почти неизменной эффективности для NDP-α-MSH. Однако эффективность сетмеланотида была сравнима с MC4R дикого типа, но значительно снижалась для NDP-α-MSH (фиг. 4a, e; дополнительная информация, таблицы S7, S8).

Это означает, что h364 ^{6. 54} –F261 ^6.51,, действует как начальный агонист-зависимый триггер, при этом h364 ^6.54 напрямую контактирует с обоими агонистами, тогда как F261 ^6.51 специфически взаимодействует с сетмеланотидом. Вообще, этот триггер, по-видимому, играет существенную роль в передаче сигнала в сторону соседней наклоняющей спираль области TM6-CWxP ^6.50 (Fig. 5a, c, d).

Рис. 5: Активация рецептора MC4R опосредуется TM3 и облегчается TM6.

Суперпозиция агониста NDP-α-MSH (зеленый / оранжевый) и антагониста SHU9119 (синий / серый), связанных с MC4R.Предполагаемый путь активации от LBP к интерфейсу Gs-белка выделен зелеными стрелками и запускается взаимодействиями лиганда в TM6, вызывая открытие TM6 вокруг W258 ^6.48. Антагонистическое действие облегчается взаимодействием d-Nal4 ¹ с L133 ^3,36 (показано синими стрелками) и впоследствии заблокированным «тумблером» на W258 ^6,48. b Вид сверху карманов лигандов подчеркивает (стрелки) относительное расположение трансмембранных спиралей TM1-6 (антагонизированные по сравнению с активными структурами). c , d Сравнение активных и антагонизированных структур MC4R. d Суперпозиция активных структур NDP-α-MSH – MC4R и SHU9119 – MC4R. Относительные движения мотивов CWxP ^6,50, P ^5,50 (M) IF, N (D) P ^7,50 xxY и DR ^3,50 Y, которые сопровождают активацию рецептора, выделены черными стрелками. Ключевые остатки, участвующие в активации рецептора, показаны в виде стержней.

Мутация W258A в CWxP ^{6.Мотив 50} MC4R приводит к значительному снижению, но не к полной потере передачи сигналов Gs (дополнительная информация, рис. S15o, p, и ²⁸). Это сопровождается снижением экспрессии на клеточной поверхности (дополнительная информация, рис. S15b), что указывает на потерю структурной целостности этого мутанта. С другой стороны, вариант W258F экспрессируется на поверхности клетки, как и дикий тип, но демонстрирует более высокую базальную рецепторную активность и немного сниженную передачу сигналов Gs, стимулированную лигандом, по сравнению с MC4R дикого типа (дополнительная информация, рис. S15f). Важность ароматического остатка в этом положении дополнительно подчеркивается тем фактом, что ~ 70% неароматических GPCR класса A содержат W ^6.48 и ~ 16% F ^6.48.

В целом, W258 ^6.48 перемещается между антагонизированной и активной структурой состояния (дополнительная информация, рис. S16) и имеет важное значение для регулирования сигнализации. Однако этот триптофан — не единственный ключевой переключатель для передачи сигнала MC4R в трансмембранном ядре, где дополнительные аминокислоты вносят вклад в активацию рецептора.

Ключевые сайты для распространения сигнала в трансмембранном ядре

Мотив MC4R-CWxP ^6,50 пространственно окружен протяженной гидрофобной средой, состоящей из I137 ^3,40, F201 ^5,47, F254 ^6,526, F254 ^6,416, и I291 ^7,42, из которых только F254 ^6,44 и I291 ^7,42 демонстрируют значительные смещения по сравнению с антагонизированными структурами с агонизируемыми структурами (рис. 5а). Важно отметить, что в большинстве других GPCR класса A только небольшие аминокислоты, такие как аланин или глицин, присутствуют в положении 7.42 (Supplementary information, Fig. S12e), и только несколько примеров, таких как рецепторы грелина или тиротропина (которые оба также обладают высокой базальной активностью в передаче сигналов Gs) имеют там более крупные ароматические аминокислоты. В MC4R мутант I291A не может индуцировать передачу сигналов цАМФ, тогда как замена I291 большей гидрофобной боковой цепью фенилаланина частично сохраняла передачу сигналов (дополнительная информация, рис. S15f). Это наблюдение вместе со специфическим взаимодействием I291 ^7,42 с W258 ^6.48, наблюдаемое в структурах, связанных с агонистами, подразумевает гидрофобное взаимодействие между положениями 7.42 и 6.48 в MC4R, которое является обязательным для регуляции активации рецептора.

Кроме того, F254 ^6,44 (TM6) вместе с I137 ^3,40 (TM3) и M204 ^5,50 (TM5) образуют IF-мотив M ^5,50 в MC4R, напоминающий типичный для GPCR класса A P ^5,50 IF-мотив (P ^5,50 -I ^3,40 -F ^6,44), участвующий в поддержании неактивного состояния рецептора. ³³ Интересно, что все замены остатков в мотиве IF MC4R-M ^5,50 (I137A, I137F, F254A, F254M и M204A) не влияют на передачу сигналов, индуцированную агонистом (дополнительная информация, рис. S15g, o – r и Таблицы S7, S8). Однако M204 ^5,50 вызывает прямую спиральную конформацию TM5, тогда как большинство других GPCR класса A содержат P ^5,50 в этом положении (~ 80% консервативных), который вызывает изгиб / выпуклость в трансмембранной спирали ³⁴ ( Дополнительная информация, рис.S14). Кроме того, варианты MC4R, несущие замену M204A или мутацию L205F соседней аминокислоты, демонстрируют значительно усиленную базальную передачу сигналов по сравнению с MC4R дикого типа (дополнительная информация, рис. S15g), что указывает на то, что этот сегмент TM5 имеет решающее значение для регуляции базальной активности передачи сигналов. .

Несмотря на гидрофобное взаимодействие с I291 ^7,42 в TM7, W258 ^6,48 также связан в активном состоянии посредством водородной связи с N294 ^7,45, который, в свою очередь, связан с D298 ^{7. 49} мотива N (D) P ^7.50 xxY в TM7 (рис. 5c). Это взаимодействие немного сдвигает мотив N (D) P ^7,50 xxY в сторону GBC (рис. 5c), сопровождаемый поворотом Y302 ^7,53 в направлении Y212 ^5,58 в TM5. Это ориентирует Y212 ^5,58 в положение, которое стабилизирует активную конформацию R147 ^3,50 в мотиве Y DR ^3,50, который является частью интерфейса G-белка.

Противодействие MC4R путем препятствования формированию активного состояния

Антагонистический пептид SHU9119, недавно совместно кристаллизованный с антагонизированным MC4R, ¹⁶, представляет собой укороченное, модифицированное и циркулярное производное NDP-α-MSH ³⁵ (Фиг. .1а). Режим связывания SHU9119 в целом аналогичен режиму связывания NDP-α-MSH. Почти идентичные гидрофобные контакты существуют в центральном мотиве H ⁰ x ¹ R ² W ³, как в NDP-α-MSH (дополнительная информация, рис. S11 и таблица S4). W6 ³ также зажимается h364 ^6.54 (TM6) и S188 ^EL2, а R5 ² соединяет TM3-TM4 и EL2 посредством водородных связей с S188 ^EL2 и I185 ^4.61 (рис. 2i; Дополнительная информация, рис.S11 и Таблица S4). Следовательно, все три лиганда демонстрируют сходный паттерн взаимодействия в верхней части LBP, включая участие Ca ²⁺ во взаимодействии с мотивом EDD. Это поднимает вопрос о том, как SHU9119 противостоит MC4R.

Это можно объяснить только действием неприродной аминокислоты d-нафтилаланина (d-Nal4 ¹) в SHU9119 в позиции x ¹ в H ⁰ x ¹ R ² W ^{3 мотив}, соответствующий dF ¹ в NDP-α-MSH и сетмеланотиде (рис.1а, 2г – е). В отличие от структур активного состояния, представленных здесь, объемная ароматическая боковая цепь d-Nal4 ¹ SHU9119 толкает боковую цепь L133 ^3,36 вниз, сопровождаясь вертикальным сдвигом вниз в верхней половине TM3 на ~ 1 Å. (Рис. 5а). Таким образом, боковая цепь L133 ^3,36 перемещается перед W258 ^6,48, что исключает возможность движения TM6 наружу (рис. 5a). Это структурное наблюдение функционально подтверждается тем фактом, что единственная мутация L133 ^3.36 в более гибкую и не громоздкую боковую цепь метионина превращает SHU9119 в агонист. ³⁶ Следует отметить, что SHU9119 является частичным агонистом ^35,37 для MC1R (с M128 ^3,36) и MC5R (с V126 ^3,36) (дополнительная информация, рис. S12b, S17), соответственно. В дополнение, меланотан II ³⁸ почти идентичен SHU9119, за исключением того, что он содержит d-F ¹ вместо d-Nal4 ¹ и агонизирует MC4R (рис. 1a). Наша функциональная характеристика MC4R-L133 ^{3.Замены 36} либо на аланин, либо на фенилаланин не влияют на передачу сигналов NDP-α-MSH, подтверждая наблюдение, что меньший dF ¹ не влияет на положение L133 ^3,36 (дополнительная информация, рис. S15o, p и таблицы S6, S7).

Таким образом, SHU9119 демонстрирует сходный паттерн связывания в верхней части LBP MC4R по сравнению с агонистами, но действует как антагонист из-за взаимодействия d-Nal4 ¹ –L133 ^3.36. Это сравнение подтверждает ключевую роль обсуждаемого выше гидрофобного взаимодействия W258 ^6.48 и I291 ^7,42, которые захватываются в неактивном или антагонизированном состоянии смещенным L133 ^3,36 (рис. 5a).

Внутриклеточный TM3 как преобразователь индуцированного агонистами связывания G-белка

В антагонизированной структуре MC4R R147 ^3,50 мотива DR ^3,50 Y в TM3 образует потенциальные водородные связи с T150 ^3,53 и D146 ^3,49 боковых цепей и с основной цепью N240 ^6,30 в переходе IL3 – TM6 (рис.6a), что контрастирует с другими неактивными структурами GPCR класса A (например, β2AR, рис. 6c). Кроме того, боковая цепь N240 ^6,30 взаимодействует через водородную связь с кислородом основной цепи в положении T150 ^3,53, что предполагает внутриклеточный двойной замок, образованный водородными связями между TM3 и TM6, который стабилизирует неактивное состояние MC4R (рис. 6а). Более того, IL2 образует короткую 3 ₁₀ -спираль в инактивированном MC4R, что делает возможным взаимодействие D146 ^3.49 с Y157 ^IL2-3.60 в IL2.

Рис. 6: Внутриклеточные взаимодействия в щели связывания между MC4R и Gs-белком.

a , b Внутримолекулярные взаимодействия в сайте IL2 – TM3 – TM6, стабилизирующие антагонизированный MC4R (PDB ID: 6w25 ¹⁶) ( a ) и неактивный β2AR (PDB ID: 2rh2 ^{66 ^{66 ^{) ( б ). c — e Общий вид MC4R – G с увеличенными областями, показанный на d и e .Активные структуры комплекса рецептор-Gs MC4R связаны с NDP-α-MSH ( d ), сетмеланотидом ( e ). f Соответствующая область в рамке ( b ) в комплексе β2AR-Gs (PDB ID: 3sn6 ¹⁸). Черные пунктирные линии указывают на гидрофильные взаимодействия.}}}

Сравнивая активную структуру с антагонизированной структурой MC4R, активация рецептора сильно сопровождается перестройками боковой цепи мотива DR ^{3. 50} Y, которые считаются типичными для активации GPCR класса A (рис.6). ³⁹ MC4R-R147 ^3,50 стабилизируется водородной связью с Y212 ^5,58 в TM5, составляя основу полости G-белка. Обширные взаимодействия на границе между активированным MC4R и Gs-белком происходят через α5-спираль домена Gαs и его C-концевую петлю, называемую C-cap, которая уже была описана для др. Комплексов GPCR-G-белок. ^18,40

После нарушения двойной блокировки MC4R TM3 – TM6 взаимодействием лигандов и наклоном TM6 наружу (рис.6а), оба остатка, R147 ^3,50 и T150 ^3,53, приобретают ключевую роль в формировании конформации активного состояния. R147 ^3,50 образует стэкинг-взаимодействие катион-π с боковой цепью Y377 ^α5,23 (CGN в верхнем индексе ⁴¹) в α5 C-cap.

Боковая цепь Y377 ^α5,23 дополнительно стабилизируется водородной связью с T150 ^3,53 (рис. 6d, e), которая участвует в стабилизации неактивного состояния. Такая стабилизация за счет взаимодействия дополнительных водородных связей не была идентифицирована в др. Комплексных структурах GPCR-Gs, известных до сих пор, и подчеркивает T150 ^3.53 как ключевой сайт в процессе переключения между неактивными и активными конформациями MC4R. Подобное взаимодействие наблюдалось только между S126 ^3,53 мускаринового рецептора M1 и Y356 ^α5,23 из G11-белка. ²⁵ Следует отметить, что большинство GPCR класса A содержат аланин в соответствующем положении MC4R-T150 ^3,53 (дополнительная информация, рис. S18).

Наши данные о передаче сигналов Gs для нескольких мутантов T150 ^3,53, включая патогенную замену T150I, ^42,43, подтверждают важную роль этого межмолекулярного полярного взаимодействия (рис.4б, е; Дополнительная информация, таблицы S7, S8). T150 ^3,53 замены гидрофобными и кислотными остатками резко снижали индуцированное агонистом накопление цАМФ для сетмеланотида и NDP-α-MSH (рис. 4f, g). Напротив, мутант T150S демонстрирует сопоставимый уровень передачи сигналов для стимуляции NDP-α-MSH (рис. 4b, f; дополнительная информация, таблицы S7, S8). Примечательно, что в отличие от нарушенного накопления цАМФ максимальное связывание (эффективность) Gq / 11 для варианта T150A не изменяется при стимуляции NDP-α-MSH или сетмеланотидом (рис.4d, h), что предполагает, что интерфейс α5 спираль-G-белок / TM3-MC4R варьируется между Gq / 11 и Gs при T150 ^3,53. Напротив, эффективность мутантной T150A-стимулированной передачи сигналов Gq / 11 сетмеланотидом и NDP-α-MSH отличается на 92 нМ и 12 нМ, соответственно (фиг. 4d, h; дополнительная информация, таблица S9). Это setmelanotide-специфическое снижение активации PLC указывает на лиганд-зависимый эффект на T150 ^3,53, который влияет на предпочтения связывания G-белков при переходе TM3 – IL2.

Общие и уникальные взаимодействия G-белка с IL2

Одно из наиболее важных взаимодействий между IL2 MC4R и Gs образовано остатками L155 ^{, IL2-3. 58} и F362 ^α5.08 (рис. 7a, b ). В комплексе MC4R – Gs боковая цепь L155 ^IL2-3.58 расположена на границе раздела между Gαs αN – β1 переходом, поворотом β2 – β3 и α5-спиралью (рис. 7a, b). Эта блокировка IL2 – β2 / β3 – α5 из L155 ^IL2-3.58 напоминает известный F139 ^IL2-3.58 -F376 ^α5.08 взаимодействует в комплексе β2AR-Gs (рис. 7c) или взаимодействует с Gq-связью на рецепторах M1 и M3. ⁴⁴

Рис. 7: Регулировка Gs-белка на IL2.

a — c Отображение интерфейса связывания между TM3 – TM5 и Gs-белком в NDP-α-MSH ( a ), сетмеланотид ( b ) связал комплексы MC4R – Gs и β2AR –Gs комплекс (PDB ID: 3sn6) ( c ). Взаимодействие IL2 и TM3 показано черными пунктирными линиями. d — f Суперпозиция комплексов NDP-α-MSH – MC4R – Gs и сетмеланотид – MC4R – Gs с комплексом β2AR – Gs демонстрирует блокировку IL2 – β2 / β3 – α5 L155 ^IL2 (MC4R) с V203 и F362 (Gαs), а также с F139 ^IL2 (β2AR) с V217 и F376 (Gαs), регулирующими положение спирали α5. Можно заметить относительный сдвиг α5, который приводит к небольшому вращению всех G, связанных с MC4R, по сравнению с поворотом, связанным с β2AR, что наиболее заметно по смещению спирали αN. e Суперпозиция обеих структур MC4R-Gs, связанных с агонистами, подчеркивает изменения водородных связей между остатками Gαs и IL2 (пунктирные прямоугольники).

Следует отметить, что многие GPCR класса A отображают лейцин или изолейцин в позиции IL2-3,58 (дополнительная информация, рис. S18). В соответствии с важной ролью IL2 и положения 3.58 в Gs-сцеплении, ранее исследованные мутанты L155A, R147A, T150A и Y157A, как было показано, устраняют любую базальную сигнальную активность MC4R, ⁴⁵, предположительно, нарушая интерфейсные контакты между рецептор и его эффекторный белок.

Наконец, комплекс β2AR-Gs обнаруживает более плотное взаимодействие α5-спирали с TM5 (Fig. 7d, e), вероятно, вызванное различиями в специфических взаимодействиях IL2-3.58 и Gs-α5.08. Следовательно, несколько дальнейших взаимодействий в сети TM3 – IL2 – α5-спиралей отличаются от комплекса β2AR – Gs (рис. 7a – c), что приводит к смещению αN-спирали в активных комплексах MC4R – Gs (рис. 7d, f ).

Интересно, что тонкие различия на границе раздела IL2-G-белок могут наблюдаться между двумя структурами комплекса агонист-MC4R-Gs.Во-первых, в комплексе NDP-α-MSH-MC4R, T162 ^IL2-3.65 предположительно образует водородную связь с Q35 ^αN в αN-спирали и Q156 ^IL2-3.59 с основной цепью D201 ^s2s3 в развороте β2 – β3 Gαs (рис. 7a, b, e; дополнительная информация, рис. S19, S20). Ни один из этих контактов не присутствует в сетмеланотидном комплексе, скорее всего, из-за вращения боковых цепей T162 ^IL2-3.65 и Q156 ^IL2-3.59 (рис. 7b; дополнительная информация, рис.S19, S20).

Заметное различие между двумя комплексами агонист-MC4R обнаруживается во взаимодействиях, образованных остатком h258 ^IL2-3.61 в IL2. В обоих комплексах h258 ^IL2-3.61 является частью сети опосредованного водой взаимодействия с h473 ^{α5. 19} в спирали Gs-α5 (рис. 6d, e). Однако в комплексе NDP-α-MSH-MC4R-Gs боковая цепь h258 ^IL2-3.61 является более гибкой и определяет две различные конформации ротамера, что не наблюдается в комплексе сетмеланотид-MC4R-Gs (рис.6д, д; Дополнительная информация, рис. S21, S22). В последнем случае происходит дополнительная опосредованная водой стабилизация h258 ^IL2-3.61 с участием A154 ^IL2-3.57 в IL2 (рис. 6e).

Интересно, что мутация h258A приводит к конститутивной активации рецептора Gs (дополнительная информация, таблицы S7, S8 и ⁴⁵) в соответствии с патогенным мутантом по увеличению функции h258R ^46,47 и другими конститутивно активирующими мутантами D146A, F149A и F152A ⁴⁵ в IL2, но не нарушает передачу сигналов Gs, индуцированную NDP-α-MSH или сетмеланотидом (рис.4б, е). В отличие от передачи сигналов Gs, максимальная передача сигналов Gq / 11 мутанта h258A снижается до 50% по сравнению с сигналом дикого типа для NDP-α-MSH и стимуляции сетмеланотидом (рис. 4d, h). Таким образом, этот остаток, наряду с T150 ^3,53, является вторым идентифицированным рецепторным сайтом, в котором профиль передачи сигналов G-белка сдвигается в результате мутации, что указывает на различные роли аминокислот дикого типа при связывании с различными G-белками. Наконец, наши данные убедительно подтверждают важную роль этого остатка рецептора IL2 для опосредованной лигандом активации Gq / 11, но не для активации Gs.

Четыре G для развития вашего бизнеса в хорошие и плохие времена

Прошел год с тех пор, как я в последний раз публиковал «Солевой адрес», однако изменения на рынке, изменения глобальных позиций предложения и погода — все это факторы, о которых я хотел бы поговорить в этой части моего информационного бюллетеня о рынке. . Как всегда, этот информационный бюллетень заполнен гиперссылками на мои справочные источники, так что вы можете прочитать тот же чайный лист, который я читаю, и сделать свои собственные выводы.

В целом, на мой взгляд, сейчас это покупательский рынок противообледенительных материалов. Однако этот рынок очень хрупок, и не нужно много, чтобы склонить чашу весов в другую сторону, поэтому мы выступаем за то, чтобы ранний покупатель получал наименьшие затраты.

СОЛЬ
Бизнес по производству соли земли меняется и немного сокращается, что касается крупных производителей. Многие люди знали о приобретении компании International Salt компанией K + S из Германии в 2006 году три года назад, но некоторые могут не знать, что K + S продолжила расширять свои интересы в области соли прошлой осенью, когда они успешно завершили сделку по приобретению Morton Salt. Штаб-квартира компании находится в Чикаго.Бизнес Morton прекрасно дополняет глобальные позиции K + S, и теперь она уверенно занимает лидирующие позиции в качестве крупнейшей солевой компании на планете. Комиссия по ценным бумагам и биржам выдвинула ряд требований к K + S при закрытии, чтобы избежать того, что они воспринимали как рыночные конфликты, вынудив K + S отказаться от определенных позиций в определенных портах, где SEC считала потенциальный предел конкуренции. На мой взгляд, Комиссия по ценным бумагам и биржам (SEC) создала непредвиденную прибыль для компаний Eastern Salt и Granite State Minerals, оба из которых были бенефициарами сделки, но я полагаю, что в больших масштабах продаж Morton почти в 3 миллиарда долларов был вынужден отказаться от части их с трудом заработанный бизнес для конкурентов не имеет значения.Соль, несомненно, является основным и жизненно важным бизнес-подразделением для K + S, поскольку они сейчас рассматривают возможность разгрузки COMPO, периферийного бизнес-подразделения в своем бизнесе по производству удобрений.

На что стоит обратить внимание этой осенью и зимой, будет спрос в Канаде, где находится значительная часть рыночной доли Morton. Прошлой зимой в восточной части Канады было одно из самых низких значений снегопадов за всю историю наблюдений, а в таких заснеженных местах, как Торонто, Монреаль и Оттава, снега почти не было. В результате на пристани остались огромные запасы, которые теперь служат резервом для запасов в шахтах и вдоль каналов распределения. Фактически, единственный рынок, на котором прошлой зимой наблюдался небольшой всплеск спроса на соль, был Среднеатлантический регион, который был раздавлен рекордными снегопадами и последующим спросом на соль.

Не забывайте, что соль является самым основным товарным химическим продуктом в мире, и более половины отпускных цен на соль обычно приходится на транспортировку и погрузку / разгрузку. Таким образом, избыточные тонны, лежащие в доках в Канаде, не могли быть экономически отправлены в Балтимор и Филадельфию для удовлетворения пикового спроса в Средней Атлантике.Этот продукт находится там, где он впервые приземлился, в ожидании снега в Канаде, и это, вероятно, значительно повлияет на доставку соли по морю в эти места. Соль обрабатывают «YPS» в качестве агента, препятствующего слеживанию, но эта добавка делает ее непригодной для неметаллических рынков, таких как фасованная соль и смеси, но некоторые компании начинают фасовать и смешивать дорожную соль; Итак, будьте бдительны.

Производители первичной соли, похоже, также делают стратегический шаг, чтобы сократить или ограничить продажи сушеной средней соли для упаковки в мешки.Соль в мешках обычно представляет собой тщательно высушенный и просеянный продукт премиум-класса. Наши средние тонны соли уже полностью готовы к предстоящему зимнему сезону 2010/2011, и мы не можем получить больше от наших традиционных поставщиков. Мы изучаем новые источники средней солнечной соли, которые, по нашему мнению, помогут восполнить этот пробел; однако жюри для нас еще не решено.

В этом сезоне потребителей и конечных пользователей предупреждают, что они должны быть очень осторожны и проверять образцы любой соли в мешках, которую они планируют покупать.Многие компании уже закупают дорожную соль и дорожную соль, которые не просушены, не просеиваются и содержат большое количество мелких частиц. Для получения дополнительной информации и фотографий солевых продуктов и их различий посетите нашу страницу с солью на нашем веб-сайте. Мы видим много мусорной соли, и многие упаковщики просто бросают дорожную соль по 50 долларов за тонну в мешок. В некоторых случаях им это может сойти с рук; но в большинстве случаев содержание влаги слишком велико, и этот продукт превратится в пятидесятифунтовую бумажную массу, поэтому убедитесь, что вы знаете, что покупаете!

Кроме того, движущей силой рынка сыпучей соли в этом году является резкий и значительный рост морских перевозок.Дополнительное давление на импортную соль из-за падающего евро будет еще больше ущемлять рынок соли и, вероятно, приведет к повышению цен в США, поскольку отечественные производители тщательно соблюдают свои цены на соль. Не забывайте, что импортная соль была очень важным фактором на рынке США с точки зрения ценообразования, а импортная соль сегодня составляет значительную часть рынка США. Многие люди не знают об импорте соли из Канады, Чили и Европы и о том, как он влияет на цены. Также не забывайте, что на продажу противообледенительной соли приходится лишь около 45% от общего рынка США, поэтому, хотя противогололедная соль составляет около половины бизнеса, это не все, ни в коем случае, и другие рынки также косвенно затронуты этими тенденциями. .

Реальность увеличения затрат на морские перевозки в сочетании с падением курсов валют в ключевых странах, производящих соль или торгующих ею, может привести к значительному росту цен, даже если поставки слишком велики. Это противоречит нашим обычным ожиданиям относительно длительных поставок сырьевых товаров, вызывающих обвал цен. Как многие биржевые маклеры говорили клиентам около года назад, говоря о ценах, «нельзя выпасть из окна подвала»; Таким образом, в этом контексте цены на соль имеют тенденцию приближаться к нижней границе потенциальной кривой цен из-за их сырьевого характера.Признание этого фактора поможет многим избежать внезапного скачка, когда другие факторы, такие как спрос, заставят вас ожидать снижения.

Прежде чем полностью замазать солью, будьте осторожны с тем, что вы покупаете и когда покупаете в этом году, поскольку эти рыночные факторы наверняка повлияют на цену и качество соли для конечного потребителя.

ЖИДКОСТИ
Жидкости — это все кайф. Они нужны всем, а дезинформации о жидкостях больше, чем информации.

Грандиозные претензии производителей добавок-бутиков распространяются на нашем рынке и служат только для того, чтобы еще больше запутать потребителей и конечных пользователей.

Что касается нашего опыта на влажном востоке США, то, хотя некоторые жидкие солевые продукты полезны и хорошо работают, вы не можете заменить программу химического удаления льда тем же материалом в жидкой форме, потому что в воде слишком много воды. жидкость.

Большинство жидких антиобледенителей содержат 30% хлорида, если учесть, что сухой материал превращается в жидкость при смешивании со снегом.Итак, когда неосведомленные или дезинформированные пользователи жидкости начинают заливать лед 70% воды и удивляться, почему он не тает, скажите им, что у вас есть догадка относительно того, почему.

Это вовсе не означает, что жидкости — это плохо; они великолепны!

Однако они являются еще одним инструментом в арсенале снегоуборщиков, а не заменой сухих продуктов, как показывает наш опыт.

Использование жидкости для защиты от обледенения (нанесение перед ураганом) и для предварительного смачивания (покрытие солью) по-прежнему является основным способом наиболее эффективного использования жидкостей в зимних операциях по борьбе с обледенением.

Мы храним и предлагаем практически все формы жидких антиобледенителей наливом, а некоторые ароматизаторы доступны в упаковке. Жидкий хлорид кальция, жидкий хлорид магния, жидкая соль или солевой раствор и ацетат калия — все это складские товары, которые обычно легко получить в одном из наших распределительных центров.

DRY DEICERS
Сильная среднеатлантическая зима будет стимулировать спрос на премиальные и упакованные антиобледенители в этом регионе. Длинные запасы из-за мягкой зимы повсюду, скорее всего, приведут к драке за снижение цен в начале сезона, быстрое достижение дна и последующий подъем оттуда по мере приближения зимы и появления запасов с более высокой стоимостью замещения.

Сухой хлорид кальция
Сухой хлорид кальция сейчас находится в очень интересном состоянии. У нас есть успешное завершение сделки по продаже хлористого кальция компанией Dow компании Occidental Chemical, в результате чего OXY впервые участвует в производстве хлорида кальция. Учитывая слабый зимний спрос в большей части США и Канады, мы подозреваем, что запасы в OXY по-прежнему очень хорошие, а цены в этом сезоне не выросли, что является еще одним признаком того, что сейчас дела обстоят довольно конкурентоспособно.

Большой вопрос, который сейчас волнует всех, кто занимается хлоридом кальция, заключается в том, запустит ли Tetra свой завод в Магнолии, штат Арканзас, по производству хлопьев и гранул. Сразу за этим, по всей видимости, застопорился проект на Тринидаде с бывшим производственным предприятием General Chemical, которое было перенесено туда из Манисти, штат Мичиган, чтобы обеспечить сухое производство для нового стартапа после закрытия General в 2002 году. Информации об этом частном предприятии трудно найти по, но ходят слухи, что эти заводы и оборудование стоят на земле в Тринидаде и не двигаются с первой точки остановки, когда они были доставлены более двух лет назад.Последний пресс-релиз компании был прошлой весной, так что я тоже не ожидал, что что-то оттуда придет слишком рано.

Рост тарифов на морские перевозки и снижение курсов валют, как мы упоминали в разделе о соли, будут держать Китай в затруднительном положении с поставками хлорида кальция на рынок США. Поскольку у многих оптовиков, таких как мы, осталось гораздо больше запасов, чем мы ожидали в конце зимы (январь), мы уже видим и предлагаем некоторые выгодные предложения по нашим оставшимся запасам, чтобы вывести их, чтобы мы могли полностью заменить с хлоридом кальция отечественного производства и поставки.Ранняя покупка хлорида кальция будет рынком покупателя, судя по тому, что мы видим на данный момент, когда запасы перемещаются, чтобы расчистить путь для поступления нового материала или его замены.

Сухой хлорид магния
Сухой хлорид магния, гранулы MAG и хлопья MAG также довольно долго находятся в запасах на данный момент. MAG обычно не хранится в больших запасах; и, будучи хорошим продуктом с сильным спросом, обусловленным экологическими предпочтениями, он быстро закончится, если спрос быстро вырастет.Цены на MAG не изменились по сравнению с прошлым сезоном, но Dead Sea старается хеджировать свою ставку в этом году из-за явного отсутствия каких-либо указателей цен «в сезон». Небольшое повышение для покрытия морских фрахтов осуществляется в предсезонный период и вступит в силу осенью, так что это тоже означает, что вы покупаете заранее, чтобы получить лучшую сделку, если только вы не любите играть в азартные игры. В результате мягкой зимы в целом наши предсезонные цены на MAG в этом августе на самом деле ниже, чем они были в августе прошлого года, даже с учетом повышения, поэтому мы стремимся заключить некоторые агрессивные ценовые предложения для всех, кто хочет купить рано и спасти.

Хлорид магния из Европы и Китая существует в течение последних нескольких лет, но он не имеет сопоставимого качества как в форме хлопьев, так и в форме гранул, и мы видели довольно много возражений со стороны клиентов, которые пробовали другие бренды и быстро вернулся в MAG из-за проблем с размером частиц, закупоривающих разбрасыватели этих других «я тоже» брендов. Опять же, не ожидайте, что MAG будет там, когда пойдет снег. Он всегда сначала заканчивается, а потом медленно восстанавливается; Итак, если вы хотите сухой хлорид магния Мертвого моря, лучше заказывать заранее.

Хлорид магния местного производства производится только в штате Юта, поэтому перевозки и логистика являются сложными, особенно с учетом роста объемов дизельного топлива. Форма гранул, и это тоже часто не нравится, когда конечные пользователи начинают использовать гранулы и хлопья MAG Мертвого моря. MAG Мертвого моря — действительно хороший продукт, и это невозможно отрицать.

Посетите наш новый веб-сайт (который должен быть запущен к 15 августа) для получения подробной информации и сравнений по всем антиобледенителям премиум-класса.

СМЕСИ
Ач, смеси.Смеси в основном представляют собой окрашенную соль с щепоткой чего-то хорошего, которого недостаточно, чтобы на самом деле принести большую пользу или увеличить соль, но позволяет маркетологу делать броские заявления и заявления, восхваляющие микрокомпоненты, как если бы они были всем, что было в сумка. Мы продолжаем выступать за соблюдение правды в маркировке антиобледенительных продуктов и призываем клиентов ТРЕБУТЬ химический анализ предлагаемых продуктов. Я сказал это тысячу раз; Тем не менее, стоит повторить: это не ракетостроение, и в антибактериальных средствах нет секретных формул.Существуют строгие законы относительно маркировки соленых продуктов; и хотя эти законы написаны с учетом пищевых ингредиентов, они по-прежнему применимы к мешку соли, который покупает потребитель, и правительству США пора навязывать правду в маркировке антиобледенителей. На рынке слишком много дыма и зеркал, и это только сбивает с толку и сбивает с толку потребителя.

Смеси

продемонстрировали огромный рост на рынке упакованных противообледенительных средств за последние два десятилетия, но за последние пять лет ситуация практически резко выросла из-за экспоненциального роста объемов противообледенительных солевых смесей.Почему? Это просто. Со стороны производителя, в смесях почти всегда преобладает соль, поэтому затраты ниже по сравнению с антиобледенителями премиум-класса и эффективными антиобледенителями. С точки зрения потребителя, маркировка является королем, и обман в маркировке упакованных смешанных антибактериальных средств сегодня можно сравнить с продажей печеночных таблеток из крытой повозки во времена Дикого Запада. Совершенно ужасно, что очень немногие компании раскрывают, что продают соль.

Мы приобрели несколько популярных смесей на рынке и протестировали их состав в лаборатории EPA; результаты не были удивительными.Эти смеси заявлены как «CMA», а этикетка на задней стороне сумки превозносит достоинства CMA. В одном случае они сказали, что это «на основе CMA», а в другом — «с покрытием CMA». Что ж, с газовыми хроматографами на миллион долларов и одним из самых сложных лабораторных испытаний, доступным в науке, ни один из представленных нами образцов не имел обнаруживаемых уровней CMA. Не один! Конечно, они были в очень модной сумке с множеством красивых фотографий деревьев, щенков и детей, играющих, но в каждом тестируемом образце лабораторный отчет возвращался с уровнем соли, превышающим 95%!

Нам довелось иметь дело с CMA, ацетатом кальция и магния, от Cryotech, и мы также получили некоторые реальные данные о CMA и соли.Минимальное количество CMA, необходимое для обеспечения некоторой защиты от коррозии в соли, составляет 20%, и на самом деле 40% более приемлемо в качестве базового уровня для защиты от коррозии. Но как насчет менее 1%? Мы используем аналогию: если мы добавим одну рюмку бензина к 20 галлонам воды, сможем ли мы затем водить машину на этой смеси? Конечно, нет! И в этом заключается выгода, которую вы действительно получаете по сравнению с тем, что люди думают, что они получают. Мы рады сообщить, что кардинально изменившись по сравнению с прошлым, компания Cargill решила присоединиться к нам в борьбе за правду в маркировке антиобледенителей! Боб О’Коннелл, менеджер по маркетингу упакованных антиобледенителей Cargill, обновляет свою упаковку и паспорта материалов, чтобы точно отразить, что находится в упаковке.

Это действительно очень важная новость, поскольку Cargill — первый производитель, который выступил и присоединился к нам в борьбе за раскрытие того, что вы покупаете, и устранение ужасной лжи на этикетках, существующей на этом рынке.

Мы предлагаем смесь, которая представляет собой инкапсулированную соль. Наша цена ниже пяти долларов за сумку; он обработан сертифицированным EPA продуктом, и мы даем сертификацию ингредиентов продукта. Это единственная смесь, которую мы продаем, и мы поддерживаем ее. Мы с радостью предоставим полную химическую разбивку по процентному содержанию продукта.

Если вы используете смесь, попросите компанию предоставить сертифицированный анализ того, что они вам продают, и посмотрите, как они смотрят на свои шнурки и пожимают плечами. Мы должны требовать и навязывать правду в маркировке смесей и всех антибактериальных средств, если мы собираемся узаконить этот рынок и не дать продавцам таблеток для печени разрушать окружающую среду ложью.

Наконец, что касается смесей, одна из причин, по которой основные производители соли ограничивают продажу солей премиум-класса средней солнечной и сушеной производителям смесителей и упаковочных компаний, заключается в том, что они видят огромную прибыль, получаемую этими «смесями» окрашенных солей, и они создают законную смесь с полным раскрытием информации и не получают справедливой доли рынка.Каждая бизнес-компания занимается бизнесом, чтобы зарабатывать деньги, и если вы зарабатываете 10% на продаже соли кому-то, кто затем перемаркирует ее и маркирует на 1400%, вы должны спросить себя, почему вы продаете им соль для начала, если ценность этого так высока? Вот и все. Делать математику.

Хорошо, я пока засуну мыльницу обратно под стойку по этой теме.

ПОГОДА
Погода всегда является ключом к производству соли для борьбы с обледенением.

Без снега и льда нет спроса.

Достаточно взглянуть на зиму 2009/2010 гг. И образовавшиеся излишки запасов по всей Северной Америке, чтобы понять, что погода всегда является ключевым фактором. Поскольку вокруг снежного пояса скапливается изрядное количество продукции, не следует толковать или полагать, что это означает, что поставки будут долгими и цены упадут. Правильная погодная последовательность в начале зимы может легко опустошить весь наземный инвентарь и заставить отрасль гоняться за спросом.

Я занимаюсь этим более трех десятилетий и за это время заметил, что несколько факторов могут принести пользу для стороны предложения и проблемы для стороны спроса в этом бизнесе.Большая часть спроса на всю зиму будет определяться количеством штормов между Днем Благодарения и Рождеством. Например, рынки, потребляющие тяжелую соль и антиобледенители, по большей части находятся в населенных пунктах, где людям необходимо передвигаться в ненастную погоду. Коридор из Ричмонда, штат Вирджиния, в Портленд, штат Мэн, северо-восток является для нас ключевой областью, так как это наша основная маркетинговая область и наш задний двор. В прошлом году со среднеатлантическими штормами у нас был самый сильный год за всю историю; однако к январю снега в районе Новой Англии и Нью-Йорка уже не было, и он оставался таким же.

Погода — ключ к успеху, и я изучаю палеоклиматологию. Я вообще не присоединяюсь к убеждению о глобальном потеплении, вызванном парниковыми газами, созданными руками человека. Я думаю, это наука вуду. Это заявление должно вызвать множество зажигательных писем!

Верю ли я в глобальное потепление? Конечно. В этом нет никаких сомнений. Если бы у нас не было глобального потепления, то весь север США и вся Канада все равно были бы погребены под сотнями футов ледникового льда. Я считаю, что мы живем в межледниковый период, и все это часть нормы.Повлиял ли человек на погоду? Совершенно верно, покрывая большую часть этой планеты людьми и развивая и / или удаляя многие природные объекты, такие как влажные леса Амазонки. Однако я совершенно не верю в теорию искусственных парниковых газов. Я думаю, что они полнейшая тупица.

11 февраля этого года НАСА запустило обсерваторию солнечной динамики на борту ракеты Atlas V. Это предоставит ученым беспрецедентную информацию о Солнце, и я считаю, что в течение десятилетия или меньше в конечном итоге приведет к революционным прогнозам погоды на Земле.Сейчас в центре внимания SDO в основном космическая погода; но, как мы узнали из школьной физики, каждое действие имеет противоположную и равную реакцию, и с этой целью я верю, что SDO станет важным игроком в понимании и предсказании погоды на Земле.

Что касается зимней погоды, то я наблюдаю несколько обнадеживающих признаков в солнечных циклах, когда поверхность Солнца и активность солнечных пятен минимальны. Если бы вы совместили активность солнечных пятен за последние 200 лет с записанными снегопадами, вы могли бы увидеть четкую закономерность, подтверждающую это.Прямо сейчас солнце находится в очень спящем состоянии, и мы приближаемся к пику этого периода. Я верю, что возможность для устойчивой или нормальной зимы есть, и произойдет ли это на самом деле, еще предстоит увидеть. При высокой активности солнечных пятен обычно выпадает мало снегопадов.

Солнечные циклы и астрономические циклы — лучшие индикаторы того, какой должна быть погода и чего мы можем ожидать, исходя из моего опыта. Эль-Ниньо это, Ла-Нинья это, плотность морского льда это, и так далее и далее, с теоретическими и некоторыми палеоклиматологическими предсказаниями.Для меня это то, где солнце находится в своем цикле, а затем ждать, пока баланс факторов выровняется. Как можно с невозмутимым видом продавать рекорд глобального потепления по количеству снегопадов в Средней Атлантике и рекордных снегопадов в Англии и Европе? Прогрев вызывает холод и снег?

Для Северо-Восточного Коридора США нам нужна правильная установка струйного течения, при которой Джет глубоко погружается в Южно-Центральную часть США, а затем захватывает теплый влажный воздух из Мексиканского залива и тащит его на север, классический «Нор’остер» гроза .Эти штормы могут вызвать несколько продолжительных снегопадов, если холод будет копаться и оставаться на месте. Если нет, то они тянут за собой слишком много теплого воздуха Персидского залива, и сначала пойдет снег, а затем пойдет дождь, который обычно не помогает.

Так что все зависит от погоды или нет.

ВЕБ-САЙТ

: MeltSnow.com будет иметь совершенно новый вид и интерактивный онлайн-форум под названием «Спросите Солти» на нашем новом веб-сайте, который должен быть запущен в ближайшее время. Мы объявим о новом сайте в пресс-релизе; однако, если вы перешли на наш существующий сайт и нашли его полезным, то наш новый сайт вам действительно понравится.Он будет содержать множество технической информации о продуктах, онлайн-паспорта безопасности материалов, листы технических данных, а также информацию о применении для каждого продукта, который мы предлагаем, что почти все, что используется для химического таяния снега и льда. У нас также есть обучающие видеоролики по таким темам, как защита от обледенения с помощью жидкостей, а также множество других полезных советов, которые мы собрали за три десятилетия работы по борьбе со снегом, льдом и пылью.

СПЕЦИАЛЬНЫЕ ФАКТЫ
Это новая функция, которую я решил добавить в свои информационные бюллетени.В каждом информационном бюллетене я постараюсь найти какое-то неясное использование продуктов для плавления льда, которые могут быть интересны читателям

Хлорид магния: Знаете ли вы, что MAG используется в качестве коагулянта в процессе производства Nigari Tofu ? Хлорид кальция: Знаете ли вы, что замачивание свежесобранных яблок в растворе хлорида кальция предотвратит образование пробковых пятен и горьких изъязвлений?
Соль: Знаете ли вы, что соль используется в декоративном бетоне? Он погружается в поверхность влажного бетона, а затем растворяется водой после того, как бетон затвердевает, чтобы оставить неровные отпечатки.

MTH Southern Pacific GS-4 4-8-4 Steam Locomotive Компания

MTH Electric Trains добавила модель паровоза Southern Pacific класса GS-4 4-8-4 в пропорции 1:32 к своей линейке одноколейных моделей RailKing. В полуобтекаемой модели используется конструкция из поликарбоната и отлитого под давлением металла, а также звуковой декодер и функции прототипного освещения.

Прототип. Паровозы класса GS-4 4-8-4 компании Southern Pacific были построены Лимским локомотивным заводом в 1941 и 1942 годах.28 двигателей с номерами от 4430 до 4457 были масляными горелками с всепогодными кабинами. Легко узнаваемые двигатели использовались в пассажирских поездах, пока их не вытеснили тепловозы.

Двигатели класса GS-4 (GS означает «Голден Стэйт» или «General Service», в зависимости от источников) были сняты с производства в период с 1956 по 1958 год. 4449, подаренный городу Портленд, штат Орегон, в апреле 1958 года. Он оставался на выставке до декабря 1974 года, когда был восстановлен до рабочего состояния.4449 вновь поступили на вооружение в апреле 1975 года в патриотической раскраске, таща американский поезд свободы по всем Соединенным Штатам в ознаменование двухсотлетия страны.

Модель. Наш образец оформлен как SP No. 4449 в характерной красно-оранжевой схеме окраски Daylight с крупными буквами на тендере. Краска локомотива гладкая и равномерно нанесена с непрозрачными полосами и логотипом Daylight на плинтусе над пилотским грузовиком. Обе стороны дымовой камеры имеют отдельно прикрепленную плиту строителя Лимы и трастовую плиту оборудования Southern Pacific.На стороне инженера также есть заводская табличка для The Superheater Co. Надписи на всех табличках хорошо читаются при увеличении.

Кузов локомотива из поликарбоната представляет собой сочетание литых и отдельно накладываемых деталей. Отдельно стоящие детали включают турбогенераторы, предохранительные клапаны, свисток, воздушный рожок (его часть), поручни и ступеньки. Формованные дверцы, швы, заклепки и заглушки четко очерчены. Дорожки имеют ромбовидный рисунок протектора.

У динамиков Boxpok есть звездочка в центре, которая указывает на смазку подушек пружины на полноразмерных двигателях.Пара комбинированных воздушных компрессоров правильно расположена над машинами со стороны пожарного.

Не стоит упускать из виду освещенный интерьер кабины, в котором изображены окрашенные и установленные на заводе фигурки инженера и пожарного, а также детально проработанная задняя часть с датчиками. Снаружи кабина оснащена регулируемым вентиляционным отверстием на крыше и боковыми окнами, отдельными ветровыми дефлекторами и металлическими поручнями.

Локомотив связан с тендером через беспроводное дышло. Это печатная плата (ПК), прикрепленная к локомотиву винтом.На каждом конце печатной платы находится обращенный вверх 10-контактный штекер. Одна вилка подключается к двигателю на заводе. Другой штифт подсоединяется моделистом к разъему на днище тендера, прямо перед передней тележкой.

Тендер имеет цельный корпус из поликарбоната. В нашем образце красно-оранжевая краска на боку пожарного имеет умеренную текстуру апельсиновой корки. Полосы и буквы непрозрачны, а черная окантовка вокруг надписи «Южный Тихий океан» соответствует регистру. В надписи над головками заклепок тендера было несколько небольших пустот.

Как и локомотив, тендер представляет собой смесь литых и отдельных частей. В передней части тендера находится масляный бак, который имеет отдельную непозиционируемую заливную крышку, отдельно стоящую вентиляционную трубу и рельефные детали.

Остальную часть тендера составляет водяной отсек с четырьмя отдельными водяными люками. Более высокий ящик, в котором хранились задние габаритные фонари на полноразмерном тендере, лепной. Лестницы и поручни — это отдельные детали, устанавливаемые на заводе.Обе стороны тендера имеют табличку доверия к оборудованию.

Корпус крепится к пластиковой раме шестью винтами с крестообразным шлицем. Внутри находится направленный вниз динамик с картонным корпусом, стальным грузом и светоизлучающим диодом (LED)
, прикрепленным к L-образному металлическому кронштейну.

Боковые рамы шестиколесных грузовиков Buckeye украшены выпуклой надписью BUCKEYE PAT’D. К углу обеих тележек привинчивается отрезок окрашенной латунной цепи. Другой конец цепи подсоединяется к днищу кузова.Металлические колеса химически почернены, а покрышки окрашены в белый цвет.

На пульте управления. GS-4 оснащен приемником Digital Command Control (DCC) и встроенным декодером DCC / Digital Command System (DCS) с Proto-Sound 3.0. Система ProtoSmoke синхронизирована с вращением колеса с четырьмя ударами на оборот. Регуляторы громкости и интенсивности дыма, а также селекторный переключатель DCC / DCS расположены за дверцей коптильни.

Множество функций освещения еще больше улучшают модель.GS-4 имеет фару постоянного напряжения; функция диммера для световых эффектов Правила 17; и работающий фонарь Mars на передней части дымовой камеры, огни класса на боках дымовой камеры и резервный фонарь в задней части тендера. Также загораются поля с цифрами. В нашем примере числовые поля отображают 2, что указывает на то, что локомотив тянет поезд № 2, рейс Sunset Limited , курсирующий на восток, который курсировал между Лос-Анджелесом и Новым Орлеаном.
Модель 4-8-4 оснащена дистанционно управляемым Proto-Coupler на тендере.

В комплект поставки входит монтажная площадка для установки соединителя Kadee (продается отдельно), а также стандартные шарнирные соединители и соединители с липучкой. Муфта
масштабного размера на передней части локомотива не работает.

К тестовой трассе. GS-4 совпадает с чертежами прототипа, опубликованными в апрельском выпуске 1972 года нашего родственного журнала Model Railroader , или находится в пределах нескольких дюймов. GS-4 опрокинул масштаб складских перевозок на 13.75 фунтов. Обладая впечатляющим тяговым усилием в 70 унций, модель 4-8-4 может буксировать 70 свободно движущихся автомобилей по прямой и ровной дороге. Это число, вероятно, увеличилось бы, если бы были установлены две тяговые шины (в комплекте).

Конденсатор позволяет двигателю работать по грязной шине и мертвым зонам до 10 секунд.

Локомотив будет работать на переменном токе (AC), постоянном токе (DC), DCC и DCS. Я начал с тестирования GS-4 в Вашингтоне с помощью LGB Jumbo. Свет и звуки загорелись в 7.5В. Локомотив начал плавно двигаться при напряжении около 11 В при масштабе 3,5 миль в час. Модель 4-8-4 развивает максимальную скорость 79 миль в час при напряжении 22 В. Максимальная скорость полноразмерного GS-4 составляла 110 миль в час.

Звуки двигателя и холостого хода, визг тормозов и дымовая единица — единственные эффекты, доступные в DC. Также обратите внимание, что двигатель не двигается, если при запуске подается более 9 В постоянного тока. При использовании постоянного тока увеличивайте напряжение постепенно.

Затем я протестировал модель с системой MTH DCS, которая дала доступ к различным Proto-Sound 3.0 звуковых и световых эффектов и активировал Proto-Coupler. Модель плавно двигалась на скорости 1 см в час и достигла максимальной скорости 120 см в час. Звуковая система довольно крепкая. Несколько коллег — как железнодорожные, так и не железнодорожные фанаты — заглянули в мастерскую, чтобы найти источник. Смотрел кадры в масштабе 1: 1 №1. 4449 для сравнения, и дымовая установка излучает реалистичное количество дыма.

Паровозы GS-4 4-8-4 компании

Southern Pacific, безусловно, были одними из самых узнаваемых двигателей паровой эпохи.MTH проделали отличную работу, запечатлев внешний вид, свет и звуки полуобтекаемого локомотива в масштабе 1:32.

3758-1 | ЭЛЕКТРИЧЕСКИЕ ПОЕЗДА MTH

В 1937 году южная часть Тихого океана провозгласила объявление о новом поезде в полностраничных рекламных объявлениях в журналах:

Давайте встанем на следы береговой линии южной части Тихого океана, как сейчас делают тысячи людей каждый день, и послушаем. Вдруг издалека доносится звучащая музыкальная нота. Вокруг кривой мигает цветная полоса. А вот и Daylight, самый красивый поезд на Западе!

Daylights соединили Лос-Анджелес и Сан-Франциско «в великолепном дневном путешествии, пролетевшем вдоль Тихого океана на протяжении более ста миль, затаив дыхание.«Путешественникам было предложено» Шагнуть внутрь Daylight и увидеть красоту и роскошь, которые уже покорили Запад. Обратите внимание на широкие мягкие сиденья в вагонах. Они покрыты губчатой резиной и повернуты к необычайно большим окнам ». Представляя великолепную оранжевую и красную полосу от локомотива до обзорной машины, Daylight резко отличался от обычных темно-оливковых пассажирских вагонов SP.

Ведущими поездами были северяне южно-тихоокеанского класса GS (от «Голден Стэйт»), возможно, одни из самых красивых паровых машин из когда-либо построенных.Построенные компанией Lima Locomotive Works, изобретателем сверхмощной концепции, модели Daylight 4-8-4 имели сочетание мощности и скорости, которое характеризовало мощность пара в ее зените. Двигатели класса GS-4, поставленные в 1941 и 1942 годах, были одними из последних и самых красивых в своем классе, с высокими 80-дюймовыми машинистами и закрытыми всепогодными кабинами. Помимо обслуживания первоклассных пассажирских поездов, Golden State 4-8 -4 регулярно использовались на знаменитом высокоскоростном грузовом судне Overnight SP.Задолго до того, как появилась FedEx, она обеспечивала ночные деловые поставки между Сан-Франциско и Лос-Анджелесом, перевозя все, от продуктов до запасных автомобильных двигателей.

Одинокий GS-4, № 4449, был спасен от мусора и передан в дар городу Портленду, штат Орегон, где он хранился установленным и набитым в городском парке в течение 16 лет. Джек Холст, пожилой сотрудник компании Southern Pacific, регулярно посещал двигатель, смазывая его подшипники и стержни в надежде, что когда-нибудь он снова заработает.В результате его усилий № 4449 был в достаточно хорошей форме, поэтому он был выбран в качестве западного локомотива для американского поезда свободы , вернувшись в строй всего через четыре месяца, чтобы начать поездку по стране в 1975 году в честь 200-летия нашей страны. Годовщина. Перекрашен в цвет Daylight , двигатель до сих пор стоит в экскурсионном обслуживании.